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西安百螢生物科技有限公司 主營:百螢生物圍繞熒光發光、熒光標記、熒光探針等技術進行產品研發,公司產品廣泛用于核酸蛋白定量、細胞凋亡研究、細胞信號通路研究、細胞及線粒體膜電位檢測、細胞器染色、活體示蹤、抗體標記等科研領域。
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技術文章

D蟲熒光素鉀鹽使用方法的描述

    D蟲熒光素鉀鹽是螢火蟲熒光素酶底物,其量子效率為0.88,是Luminol的20倍。反應原理:首先,在鎂離子存在下熒光素酶使熒光素與ATP反應,接著它被氧化形成二氧雜環丁烷結構并發出黃綠色的光。Luciferin-luciferase發光用于ATP監控以測定細胞活力以及**計數。它還用于報告基因檢測??膳c小動物活體成像系統配套使用,用于標記LUC基因后的體內活體熒光檢測。

D蟲熒光素鉀鹽使用方法:

1. 活體成像分析方法

   (1)    用DPBS(w/o Mg2+、Ca2+)配置D-Luciferin工作液(15mg/mL)* ,0.2 μm濾膜無菌過濾。

   (2)    注射量:10μL/g的體重,如10g 重小鼠,注射100μL 工作液(1.5 mg D-Luciferin)。

   (3)    腹腔注射10~15分鐘后,上機進行圖像分析。

2. 體外分析方法

   (1)    用無菌水配置200× 的D-Luciferin儲備液(30mg/mL)*,立即使用,或-20℃保存。

   (2)    用預熱好的完全培養基1∶200稀釋D-Luciferin儲備液,配置工作液(150μg/mL)。

   (3)    去除培養細胞的培養基。

   (4)    進行圖像分析前,向細胞中添加1× 的D-Luciferin工作液,進行圖像分析**。

    * :溶解D-Luciferin時要完全。

    **:在圖像分析前,將細胞進行37℃的短時間培養可以增加信號強度。

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